ردیابی کلی فرم ها در آب شیرین با استفاده از دو روش تخمیر چند لوله ای و واکنش زنجیره ای پلیمراز

نویسندگان

رامین مظاهری نژاد فرد1، محمدرضا خانی2

فهیمه سادات سیدعسگری3، ایرج اشرافی4، ثریا غریبی5

چکیده

مقدمه و هدف:  شناسایی و حذف پاتوژن های میکروبی از مسایل مهم بهداشتی آب بشمار می آید. در روش های تشخیصی، از باکتری اشریشیا کلی به عنوان نشانگر برای بررسی آلودگی مدفوعی استفاده می گردد. در تحقیق پیش رو میزان کارایی دو روش تخمیر چند لوله ای (mtf)و واکنش زنجیره ای پلیمراز (pcr) در شناسایی کلیفرم ها و اشریشیا کلی مورد مقایسه قرار گرفته اند. مواد و روش کار:  تعداد 15 نمونه آب از پنج منبع مختلف (آب چاه،آب لوله کشی،آب بطری شده و آب جوی) اخذ شد. سپس نمونه ها جهت بدست آوردن بیشترین شمارش احتمالی باکتری (mpn) با استفاده از روش تخمیر 9 لوله ای در محیط لاکتوز براث کشت داده شد. سپس یک لیتر از هر نمونه از فیلتر استات سلولز (با قطر منافذ 42/0 میکرون) گذرانده شده و dna باکتری به دام افتاده در فیلتر توسط کیت استخراج خالص شد. سپس نمونه ژنوم حاصل از فیلتراسیون، جهت بررسی وجود احتمالی دو ژن lacz (معرف حضور کلی فرم) و uida (معرف حضور اشریشیا کلی) در pcr استفاده شد. نتایج و بحث : با توجه به نتایج حاصل از روش mtf، تعداد هشت نمونه (3/53%) واجد باکتری های کلیفرمی و از این تعداد شش نمونه (40%) آلوده به کلیفرم مدفوعی و اشریشیا کلی بودند. همچنین نتایج pcr بیانگرتعداد ده نمونه (7/66%) آلوده به انواع باکتری های کلیفرمی بود که از این تعداد، هشت نمونه (3/53%) واجد آلودگی اشریشیا کلی بودند. از طرفی نتایج multiplex pcr بیانگر آن است که امکان ردیابی همزمان دو ژن مذکور وجود دارد. بحث و نتیجه گیری: نتایج بیانگر آن است که روش pcr در شناسایی عوامل میکروبی آب، بسیار سریع تر، دقیق تر و حساس تر از روش های سنتی مانند تخمیر چند لوله ای می باشد. علاوه بر آن بوسیله multiplex pcr می توان چندین باکتری را بطور همزمان ردیابی نمود.

برای دانلود باید عضویت طلایی داشته باشید

برای دانلود متن کامل این مقاله و بیش از 32 میلیون مقاله دیگر ابتدا ثبت نام کنید

اگر عضو سایت هستید لطفا وارد حساب کاربری خود شوید

منابع مشابه

شناسایی کلستریدیوم سپتیکوم به روش واکنش زنجیره ای پلیمراز (PCR)

li . a3"9rl aiL,;.61'l,.lo95g9s,r";lo.r;'l,q,Jtaer{J*-;*J5O+.t1r (PCR) al:9, .,rat5':.1"ri+.ltL" : g rb .a991la.iL;.5$.ir 95 2g;,r, A 9; *a llo'r,il.spyl.;-*l5ar-9ulA :ba!9al u9fe,rrl.lhrl ol..id4jlpbd I . 6.r^ir95o;U g9s'tn 31 6 tl ty. * y; : t;' 9 t l, PCR pt+l .bte-;IDNA 6l.g*l ,LJ:.1;"-J5d;t h+i5lt.#t^i .A.J'-6Jij j4'f.i 1l o'& u>lp uet a3l.5b.rol;;l osl'i;rl {f fupt{tl*J5 t;*Sl 9a:-...

متن کامل

تشخیص و ردیابی مایکوپلاسما سینوویه از مرغداری های صنعتی بااستفاده از روش واکنش زنجیره ای پلیمراز بر اساس ژنvlhA

مایکوپلاسما سینوویه مهمترین عامل بیماریزا در ماکیان است و همه سالهخسارات اقتصادی قابل توجهی را متوجه صنعت طیور در ایران می سازد. مایکوپلاسما سینوویه قادر به بیان لیپوپروتئین هماگلوتینین متغیرvlhA  Variable lipoprotein hemagglutinin A می باشد که نقش مهمی در ایجاد بیماری ایفا می کند. هدف اصلی این مطالعه تشخیص و شناسایی جدایه های مایکوپلاسما سینوویه بر اساس ژنvlhA  بود. از گله های طیور صنعتی سه اس...

متن کامل

جستجوی ژنومی کوکسیلا بورنتی در شیر گاو به روش واکنش زنجیره ای پلیمراز آشیانه ای، ایران

زمینه و اهداف: تب کیو بیماری تب­دار ریکتزیائی است که ممکن است با نشانه­های ناگهانی مانند لرز، درد پشت چشم، ضعف، کسالت و تعریق شدید تظاهر نماید. با توجه به اینکه این باکتری در دام­ها شایع هست و امکان انتقال این باکتری از طریق شیرهای آلوده وجود دارد، این مطالعه با هدف تعیین میزان شیوع کوکسیلا بورنتی در نمونه هائ شیر خام جمع­آوری شده از گاوهای شیری عجب شیر – ایران انجام گردید. مواد و روش کار: این ...

متن کامل

شیوع ویروس سیتومگال در اهداکنندگان خون ایران با استفاده از روش واکنش زنجیره ای پلیمراز

مقدمه:  ویروس سیتومگال یکی از مهم ترین ویروس های منتقله از راه خون است که می تواند سبب عوارض شدید و حتی کشنده در نوزادان با وزن کم، بیماران دارای مشکلات در سیستم ایمنی و گیرندگان پیوند شود. استفاده از روش های کاهش لکوسیت در محصولات خون و غربالگری anti-cmv بروز عفونت در گیرندگان فرآورده های خون را کاهش داده اما همچنان مواردی از انتقال عفونت به گیرندگان خون گزارش می شود. هدف از این مطالعه ارزیابی...

متن کامل

منابع من

با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید


عنوان ژورنال:
فصلنامه دامپزشکی و آزمایشگاه

جلد ۴، شماره ۱، صفحات ۱۰۶-۱۰۶

میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com

copyright © 2015-2023